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慢病毒整合標(biāo)準(zhǔn)品

背景

      嵌合抗原受體T細(xì)胞(Chimeric antigen receptor Tcell, CAR-T)免疫療法是將應(yīng)用基因修飾技術(shù)制備表達(dá),嵌合抗原受體(Chimeric antigen receptor, CAR)的T淋巴細(xì)胞,經(jīng)體外擴(kuò)增后再回輸至患者體內(nèi)的一種個體化治療方法。 近年來,隨著Kymriah,  Yescarta 以及 Strimvelis等細(xì)胞治療產(chǎn)品陸續(xù)推上市場,慢病毒作為細(xì)胞裝載CAR過程的關(guān)鍵中間載體,確保慢病毒為基礎(chǔ)的藥物質(zhì)量和安全性挑戰(zhàn)巨大。去年年底FDA公布調(diào)查CAR-T療法的安全性問題—T細(xì)胞癌癥風(fēng)險的出現(xiàn)被認(rèn)為源于其使用的基因遞送載體-慢病毒載體后,于今年1月31日正式發(fā)布“ Considerations for the development of Chimeric Antigen Receptor (CAR) T Cell Products”指導(dǎo)原則。當(dāng)中建議根據(jù)風(fēng)險評估來確定載體拷貝數(shù)(VCN)的放行標(biāo)準(zhǔn)。風(fēng)險評估包括插入位點分析、克隆優(yōu)勢、劑量、適應(yīng)癥、研究人群等研究支持的實驗數(shù)據(jù)。國家藥品監(jiān)督管理局藥品審批中心(CDE)發(fā)布的《基因修飾細(xì)胞治療產(chǎn)品非臨床研究與技術(shù)指導(dǎo)原則》也將“插入突變風(fēng)險評估”作為非臨床安全性研究的內(nèi)容,并詳細(xì)規(guī)定關(guān)鍵風(fēng)險因素的評估要點,因此CAR-T治療需要評估潛在的插入突變風(fēng)險和致癌性風(fēng)險。
 


慢病毒整合位點檢測方法

      目前檢測慢病毒整合位點的主要平臺為高深度測序(NGS)。   
 

     
      綜合考慮,科佰選擇多種方法(捕獲探針法測序+ sanger + ddPCR)驗證,充分驗證標(biāo)準(zhǔn)品的準(zhǔn)確性。在驗證過程中,捕獲探針法測序技術(shù)針對慢病毒整合位點檢測的準(zhǔn)確性得到了很好的驗證。


慢病毒整合位點標(biāo)準(zhǔn)品

      我國在2021年連續(xù)出臺了4部基因治療相關(guān)產(chǎn)品的指導(dǎo)原則都指出慢病毒整合檢測至少要包含1. 整合方向 2. 整合位置 3. 特定整合位置和整合方向的絕對克隆數(shù)目。

      針對這一要求,科佰現(xiàn)推出慢病毒整合位點標(biāo)準(zhǔn)品。

 
根據(jù)NGS(捕獲探針法測序)結(jié)果確定慢病毒插入位點,通過Sanger測序以及ddPCR法再次驗證,準(zhǔn)確定位慢病毒插入位點以及整合頻率。
 
CAR-T細(xì)胞療法被認(rèn)為是最有前途的癌癥治療方法之一,其在血液系統(tǒng)瘤中的運用已取得了優(yōu)異的療效,可靠的檢測方法可以準(zhǔn)確有效分析慢病毒插入位點,協(xié)助客戶評估插入突變的可能性以及相關(guān)的風(fēng)險,提高細(xì)胞免疫治療的安全性。
 


慢病毒整合位點檢測服務(wù)

      科佰現(xiàn)推出針對慢病毒整合位點檢測服務(wù)(捕獲探針法測序技術(shù))。捕獲探針法測序技術(shù)主要是針對LTR區(qū)域做探針捕獲,PCR后,NGS測序驗證,結(jié)合生信分析方法,判斷慢病毒插入位點。后續(xù)同時采用了sanger以及ddPCR方法對NGS(捕獲探針法測序)技術(shù)進(jìn)行了驗證,NGS(捕獲探針法測序)檢測出的位點,sanger以及ddPCR方法均檢出。 
 


      慢病毒插入位點檢測服務(wù)(捕獲探針法測序)可以協(xié)助您準(zhǔn)確定位慢病毒插入位點,慢病毒整合位點標(biāo)準(zhǔn)品不僅可以適用于多種檢測方法,協(xié)助您判斷方法的準(zhǔn)確性,還可以用于定位檢測方法的檢測限。


科佰生物

      科佰生物推出慢病毒整合位點標(biāo)準(zhǔn)品以及慢病毒插入位點檢測服務(wù)(捕獲探針法測序)。“產(chǎn)品+技術(shù)服務(wù)”,總有一款適合你!
 

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